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SARS-CoV-2 假病
假病毒描述：
SARS-CoV-2假病毒以HIV病毒为骨架，外面包被SARS-Cov-2的 Spike 蛋白，能够感染过表达人ACE2的细胞。可用于测试研究阻断病毒侵入的中和抗体或其它药物。假病毒只能单次感染，不能复制，安全性高，可在P2级实验室使用。
假病毒参数：
产品名称 | SARS-CoV-2 假病毒 |
货号 | VS-SC-0001 |
荧光基团 | eGFP和Luciferase |
生物安全防护措施 | P2级实验室 |
包装 | 100~200ul |
感染滴度 | 2×105 TU*（基于hACE2-COS7细胞） |
拷贝数 | ＞108 |
保存 | -80℃ |
* TU（transfection unit），1TU=使1个细胞发出绿色荧光。
假病毒制备：
维通达将Spike蛋白表达质粒、包装质粒、转移质粒共转染到293T细胞内，包装出以SARS-CoV-2-Spike为表面衣壳蛋白的假病毒。假病毒同时带有Firefly Luc和eGFP标记，可以通过有Firefly Luc和eGFP检测感染。示意图如下：
注意事项：
1) 病毒使用PEG8000浓缩，会有血清蛋白沉淀，外观浑浊，但不影响使用。
2) 病毒干冰运输，-80℃保存，使用前室温融化。
使用方法：
1. 第一天，96孔板每孔接种5×103个hACE2-COS7细胞。
2. 第二天，除去培养板里的培养基，新鲜培养基（100ul/孔）与假病毒2×103 TU和Polybrene混合（5ug/ml终浓度），加入培养孔，培养板离心（1200g x 2 Hour，4℃）。
（2×103 TU时，luciferase的亮度约为1×106）。
3. 离心感染的细胞，吸干净培养基，再用PBS洗一次；每孔加入30ul 0.25%的胰酶，37℃孵育5min，加入100ul完全培养基，继续培养。
4. 感染后继续培养3天（每天换液），进行luc检测，也可以观察eGFP荧光（根据情况更换培养基）。
